miR-204和miR-211下调Arx基因表达影响胰岛素分泌细胞诱导分化进程

作者：王涛; 李晨; 穆长征^*

来源：解放军医学院学报, 2020, 41(11): 1113-1117.

• 微小RNA
• 骨髓间充质干细胞
• 胰岛素分泌细胞
• 细胞分化
• 小鼠

目的探讨骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,bMSCs)向胰岛素分泌细胞(insulin-producing cells,IPCs)诱导分化过程中调控Arx(Aristaless-related homeobox)基因表达的miRNAs的鉴定。方法应用Conophylline和尼克酰胺诱导bMSCs向IPCs分化,双硫腙染色观察诱导后的细胞,细胞免疫荧光化学检测细胞内C肽的表达。生物信息学方法预测能够与Arx基因匹配的miRNAs,Real-time PCR检测诱导分化过程中预测的miRNAs以及靶基因Arx的表达。转染miRNAs模拟物进入细胞,实现过表达miRNAs后,Western blotting检测Arx蛋白以及胰岛细胞重要转录因子Pdx1蛋白的表达。结果细胞实施诱导分化后,双硫腙染色呈阳性,细胞着猩红色,免疫荧光化学发现细胞内C肽表达阳性。miRanda和TargetScan两个靶基因预测数据库显示miR-204和miR-211能够与Arx基因靶向匹配,Real-time PCR表明诱导过程中miR-204和miR-211的表达量逐渐降低,而Arx mRNA的表达量逐渐升高。Western blotting发现miR-204和miR-211的过表达能够下调靶蛋白Arx以及Pdx1蛋白的表达。结论 miR-204和miR-211能够下调IPCs诱导分化过程中Arx的表达,影响分化进程。

• 单位
  锦州医科大学; 锦州医科大学医疗学院