吴茱萸碱对肿瘤血管增生的抑制作用及其机制

作者：刘磊; 彭琴; 吴泽明; 黄欣慧; 张广献; 谭宇蕙^*

来源：医药导报, 2023, 42(09): 1305-1311.

• 吴茱萸碱
• 血管增生
• 糖酵解
• 缺氧诱导因子
• 血管内皮生长因子受体

目的 探讨吴茱萸碱对肿瘤血管增生的抑制作用及其机制。方法 以不同浓度的吴茱萸碱、二氯化钴(CoCl2)单独或联合处理人脐静脉内皮细胞(HUVECs)或人肝癌细胞(HepG2)24 h。采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖水平变化；Annexin V/PI双染流式细胞术检测吴茱萸碱对HUVECs凋亡的影响；采用CoCl2化学诱导法建立HUVECs体外模拟缺氧模型；免疫印迹法(Western blotting)检测HUVECs的缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、代谢酶(PFKFB3)和血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)蛋白表达水平。结果 MTT检测结果显示，吴茱萸碱对HUVECs、HepG2细胞增殖均有显著的抑制作用(P<0.05或P<0.01),半数抑制浓度分别为1.15、1.07μmol·L-1。流式细胞术结果表明，吴茱萸碱可以诱导HUVECs凋亡(P<0.01)。在常氧条件下，吴茱萸碱对HUVECs的HIF-1α、PFKFB3蛋白抑制不明显，但能显著下调VEGFR2蛋白表达水平(P<0.01)。5～50μmol·L-1CoCl2可使HUVECs的HIF-1α和PFKFB3蛋白表达水平显著升高(P<0.01),且呈浓度依赖性，而细胞增殖水平未见明显变化，但100～400μmol·L-1CoCl2时细胞生存率明显升高；800μmol·L-1CoCl2时细胞生存率明显降低(P<0.01)。CoCl2诱导HIF-1α高表达条件下，吴茱萸碱(0.4μmol·L-1)能显著下调HIF-1α、PFKFB3和VEGFR2的蛋白表达水平和细胞生存率(P<0.01);与吴茱萸碱组比较，联合(吴茱萸碱+CoCl2)组HIF-1α、PFKFB3蛋白水平及细胞生存率均上调(P<0.05),而VEGFR2不上调。结论 吴茱萸碱对HUVECs和HepG2细胞增殖均有显著的抑制作用，且诱导HUVECs凋亡；在CoCl2模拟缺氧条件下，吴茱萸碱可显著下调HUVECs的糖酵解(Warburg效应),其机制可能与独立下调HIF和VEGFR两条信号通路有关。

• 单位
  广州中医药大学; 基础医学院