miR-204调控SIRT1在人晶状体上皮细胞凋亡中机制研究

作者：解晓丹; 赵江月; 赵芳坤; 秦宇; 张劲松

来源：中国实用眼科杂志, 2017, 35(05): 527-532.

• miR-204
• SIRT1
• 细胞凋亡
• 白内障

目的探讨miR-204的表达水平对人晶状体上皮细胞SRA01/04凋亡活动的影响及其靶向调控SIRT1的机制。方法实验研究。对2016年611月在人晶状体上皮细胞系SRA01/04进行培养,利用过氧化氢(H2O2)构建SRA01/04细胞体外凋亡模型,实时荧光定量PCR法检测miR-204表达水平的变化;向SRA01/04转染miR-204模拟物(mimic)、miR-204抑制物(inhibitor)及其两者的阴性对照(negative control),分别上调和下调其miR-204的表达水平,转染48h后采用实时荧光定量PCR的方法验证转染效率;流式细胞仪检测miR-204对人晶状体上皮细胞凋亡过程的影响;通过文献及microRNA数据库,预测miR-204可能靶向调控SIRT1基因的表达;并采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞SIRT1表达水平。结果与正常人晶状体上皮细胞相比,miR-204在凋亡模型中的相对表达量显著增加。在人晶状体上皮细胞系SRA01/04中,上调miR-204的表达水平可以促进过氧化氢诱导的人晶状体上皮细胞凋亡,并显著降低SIRT1基因表达水平;而下调miR-204的表达水平可以减少过氧化氢诱导的人晶状体上皮细胞凋亡,并显著升高SIRT1基因的表达水平。差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 miR-204在人晶状体上皮细胞系SRA01/04凋亡模型中表达上调,miR-204可能通过调控SIRT1表达影响人晶状体上皮细胞SRA01/04凋亡,从而在以晶状体上皮细胞凋亡为基础的白内障发病机制中发挥作用。

• 单位
  中国医科大学附属第四医院; 中国医科大学