hTSHR膜外区氨基端基因原核表达载体的构建和鉴定

作者：陈慧; 方佩华; 陆凤先; 李宁; 吕枚; 许静

来源：天津医科大学学报, 2005, (02): 168-170+174.

DOI：10.3969/j.issn.1006-8147.2005.02.004

• 人促甲状腺素受体膜外区氨基端
• 基因克隆
• 测序
• 载体构建

目的:为研究人促甲状腺素受体膜外区氨基端(hTSHR462bp)肽段的免疫学特性,将hTSHR462bpcDNA片段在原核表达系统中表达,故构建原核表达载体。方法:以人Graves病患者甲状腺组织中提取mRNA为模板,利用RT-PCR方法扩增双链甲状腺组织cDNA,又以PCR技术扩增目的基因,定向克隆法构建融合基因的原核表达载体pET102-hTSHR462bp。结果:获得了重组目的基因原核表达载体并经PCR鉴定、酶切鉴定插入片段方向、大小正确,DNA测序分析表明插入处接头和读框与预期序列相符。结论:成功构建了融合基因的原核表达载体pET102-hTSHR462bp,为进一步的蛋白表达、其生物学功能研究和未来临床应用奠定了基础。

• 单位
  天津医科大学总医院