摘要

为了能有效利用山羊小腔卵泡和研究相关小腔卵泡发育的机理,将山羊小腔卵泡与卵巢皮质间质细胞、卵泡膜细胞和卵巢髓质间质细胞体外共培养,测定培养第5天卵泡直径、培养液中类固醇激素分泌量、卵母细胞特异性分泌因子gdf9和bmp15基因的表达和卵泡颗粒细胞以及卵母细胞凋亡与抗凋亡基因表达。研究结果显示,山羊小腔卵泡与卵巢间质细胞共培养5d,卵泡直径增加明显大于小腔卵泡单独培养组(P<0.05);小腔卵泡与卵巢皮质间质细胞共培养5d后,小腔卵泡分泌的雌二醇激素的量高于小腔卵泡单独培养组(P<0.01),为413.95pg·mL-1;小腔卵泡与卵巢髓质间质细胞共培养5d后,小腔卵泡分泌孕酮的量(11.695ng·mL-1)极显著高于小腔卵泡单独培养组和其他共培养组(P<0.01),小腔卵泡与卵泡膜细胞共培养5d后,小腔卵泡分泌的孕酮的量高于小腔卵泡单独培养组(P<0.05);小腔卵泡与卵巢皮质间质细胞、髓质间质细胞以及与卵泡膜细胞共培养5d后,其卵母细胞特异性分泌因子gdf9基因和bmp15基因表达显著上调(P<0.01);与卵巢间质细胞共培养5d后,小腔卵泡内卵丘细胞和卵母细胞抗凋亡基因表达上调(P<0.05),小腔卵泡内卵丘细胞和卵母细胞抗凋亡基因表达下调(P<0.05)。表明卵巢间质细胞促进小腔卵泡的生长以及类固醇激素如雌二醇和孕酮分泌,促进小腔卵泡内卵母细胞特异性分泌的生长因子(gdf9和bmp15)基因的表达,同时抑制小腔卵泡的凋亡。尤其是卵巢卵泡膜细胞与小腔卵泡共培养后明显提高小腔卵泡的抗凋亡能力。