摘要
目的构建含大鼠前列腺特异膜抗原基因(PSMA)的重组腺病毒Ad-rPSMA,并研究其在小鼠体内的特异性体液免疫反应。方法提取大鼠脑组织总RNA,经RT-PCR扩增PSMA基因片段,利用Adeasy腺病毒载体系统构建pAd-rPSMA重组腺病毒质粒,包装复制缺陷型重组腺病毒Ad-rPSMA,制备病毒颗粒。用制备的病毒感染HeLa细胞,Western blot检测PSMA基因的表达。以Ad-rPSMA重组腺病毒免疫C57小鼠,检测血清中PSMA特异性抗体。结果成功构建了含有大鼠PSMA基因的重组腺病毒,制备的病毒颗粒数为1.97×1012VP/mL,A260/A280值为1.32,病毒滴度为5×1...
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单位四川大学华西医院; 四川大学; 生物治疗国家重点实验室; 生命科学学院