TNF-α通过NF-κB增强Th9细胞分化抑制肺癌细胞生长

作者：李彦; 顾泽鑫^*; 孟祥茹; 兰冰; 李静龙; 李翠翠

来源：免疫学杂志, 2022, 38(03): 228-233.

DOI：10.13431/j.cnki.immunol.j.20220033

• TNF-α
• NF-κB
• Th9细胞分化
• 肺癌

目的 研究TNF-α通过NF-κB增强Th9细胞分化抑制肺癌细胞生长的功能并对其相关机制进行初步探讨。方法 分离野生型小鼠脾脏CD4+T细胞，体外诱导Th9细胞分化。荧光定量PCR检测IL-9、IL-5和IL-13表达，ELISA检测Th细胞分泌IL-9变化。荧光定量PCR检测TNF-α在不同时间点对Th9细胞中IL-9表达的影响；TNF-α刺激分化的Th9细胞，免疫印迹检测NF-κB通路相关蛋白p-IKKα/β和IkB-α表达。使用NF-κB通路阻断剂，荧光定量PCR检测IL-9、IL-5和IL-13的表达。将体外TNF-α刺激诱导分化的Th9淋巴细胞通过尾静脉注射入肺癌小鼠体内，荧光定量PCR检测小鼠脾脏中IL-9、IL-5和IL-13的表达，免疫印迹检测小鼠肺癌组织中凋亡蛋白Bax/Bcl2表达，免疫荧光染色检测小鼠肺癌组织细胞增殖情况。结果 荧光定量PCR显示，TNF-α联合Th9极化细胞因子TGF-β和IL-4增加Th细胞中IL-9、IL-5和IL-13的表达；ELISA实验结果显示，Th细胞分泌IL-9明显增多；荧光定量PCR显示，TNF-α处理后的Th9细胞中IL-9的表达在第2天或第3天达到最高水平；免疫印迹实验显示，TNF-α刺激NF-κB通路相关蛋白p-IKKα/β和IkB-α表达；荧光定量PCR显示，NF-κB通路阻断剂可消除TNF-α诱导的IL-9、IL-5和IL-13的表达。最后，荧光定量PCR显示，Th9淋巴细胞通过尾静脉注射入肺癌小鼠体内后，小鼠脾脏中IL-9、IL-5和IL-13的表达明显升高，免疫印迹显示小鼠肺癌组织中凋亡蛋白Bax/Bcl2表达升高，免疫荧光染色发现细胞增殖减少。结论 TNF-α可以通过NF-κB信号通路增强Th9细胞分化增强肺癌细胞凋亡，抑制肺癌细胞增殖。

• 单位
  齐齐哈尔医学院