hsa-miR-374a-3p与VEGFB在结直肠癌中的相关性和作用

作者:朱亚雯; 达静; 徐凤霞; 姜树中; 陆翠华*
来源:解剖科学进展, 2023, 29(03): 295-298.
DOI:10.16695/j.cnki.1006-2947.2023.03.019

摘要

目的 探讨hsa-miR-374a-3p与VEGFB在结直肠癌中的相关性和作用。方法 TCGA数据集分析VEGFB在结直肠癌中的表达和对生存曲线的影响;免疫组织化学方法检测59例结直肠癌组织中VEGFB蛋白的表达;ELISA方法检测结直肠正常细胞和结直肠癌细胞中VEGFB的表达。重组人VEGFB蛋白或VEGFB抗体处理后,MTT法检测细胞活力;膜联蛋白V-PE和7-氨基放线菌素D(7-AAD)染色法检测细胞凋亡水平;FASAria细胞分选仪检测细胞周期。miRNA测序检测细胞中miRNA总体表达水平;实时荧光定量PCR检测miRNA-374a-3p与VEGFB mRNA的表达水平;荧光素酶报告实验验证miRNA-374a-3p与VEGFB-3′-UTR的靶向关系。结果 VEGFB在结直肠癌组织中的mRNA和蛋白表达水平显著高于正常组织。VEGFB高表达患者的中位生存期明显低于低表达患者。与结直肠正常细胞相比,结直肠癌细胞VEGFB表达水平明显升高。VEGFB蛋白处理后,结直肠正常细胞NCM460的细胞活力水平上升、细胞凋亡水平下降。结直肠癌组织中miR-374a-3p与VEGFB的表达水平存在负相关。miR-374a-3p靶向VEGFB mRNA的3′端非编码区。敲低miR-374a-3p后,细胞中VEGFB的mRNA和蛋白表达水平均上升,细胞活力上升,细胞凋亡减少。结论 miR-374a-3p与VEGFB的表达水平在结直肠癌中存在负相关,VEGFB/miR-374a-3p轴调控结直肠癌细胞的增殖与凋亡。

  • 单位
    南通大学附属医院

全文