羟基红花黄色素A延缓高磷诱导的血管平滑肌细胞钙化及其机制研究

作者：韩怡然; 徐天华; 邱小波; 盛子桐; 万鹏志; 李悦; 姚丽^*

来源：中华肾脏病杂志, 2019, 35(11).

• 红花
• 血管钙化
• NF-κB
• 炎症
• 氧化应激

目的探讨羟基红花黄色素A(Hydroxysafflor yellow A, HSYA)在β-甘油磷酸钠(β-GP)诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)钙化过程中的作用及其机制。方法 VSMC用10%胎牛血清+1%双抗高糖DMEM培养液, 于37℃、5%CO2培养箱中培养, 根据细胞生长密度按1∶4比例传代。实验分为3组:对照组(NC)、高磷诱导钙化组(HP)、HSYA干预组(HSYA)。用茜素红染色和钙测定试剂盒(邻甲酚酞络合酮比色法)检测各组细胞钙沉积量;Western印迹法检测细胞钙化指标碱性磷酸酶(ALP), Runt相关转录因子2(RUNX2), 核因子κB受体活化因子配体(RANKL), α平滑肌肌动蛋白(α-SMA), 及TLR4/NF-κB通路和炎性反应相关指标Toll样受体4(TLR4), 白细胞介素8(IL-8), 肿瘤坏死因子α(TNF-α)的变化。抽提细胞核蛋白和细胞质蛋白, Western印迹法检测细胞核NF-κB p65和细胞质p65, 及细胞总蛋白中p65和磷酸化p65的改变。超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)试剂盒法检测细胞抗氧化酶和氧化终产物的改变。结果 Western印迹结果显示, HSYA组细胞钙化指标ALP、RUNX2、RANKL的表达量较HP组明显减少;α-SMA表达较HP组增加(均P<0.01)。HSYA组TLR4、TNF-α、IL-8和p-p65/p65的表达量较HP组减少, p65入核减少, 细胞质内p65的表达增多(均P<0.05)。HSYA组细胞SOD含量较HP组明显升高, MDA含量较HP组明显降低(均P<0.01)。结论羟基红花黄色素A可减轻高磷诱导的血管平滑肌细胞的钙化, 减少钙沉积。其机制与羟基红花黄色素A抑制了TLR4/NF-κB通路的激活和氧化应激反应有关。

• 单位
  中国医科大学附属第一医院