构建香菇转化的同源筛选标记的研究

作者：李菲; 章炉军; 姜宁; 刘建雨; 于海龙; 尚晓冬; 宋春艳^*; 谭琦^*

来源：食用菌学报, 2019, 26(04): 16-162.

DOI：10.16488/j.cnki.1005-9873.2019.04.003

• 香菇
• 萎锈灵抗性基因
• 同源筛选标记
• 农杆菌转化
• 绿色荧光蛋白

通过比对分析多种导致真菌内源萎锈灵抗性的琥珀酸脱氢酶B亚基(SdhB)氨基酸序列的突变位点,将香菇(Lentinula edodes)SdhB氨基酸序列第243位的组氨酸替换为亮氨酸,构建了香菇萎锈灵抗性同源筛选标记载体,以农杆菌介导转化小米粒培养的香菇菌丝。转化子经5次传代后,PCR扩增验证插入片段,并观察绿色荧光蛋白(EGFP)的表达情况。结果显示:香菇单核体和双核体菌株经转化后,均能筛选到具有萎锈灵抗性的转化子,单核体菌株的转化率为34%,显著高于双核体菌株(4%);单核体转化子中的同源筛选标记及报告基因稳定性较好。本研究构建的萎锈灵抗性同源筛选标记可有效地在香菇遗传转化体系中应用。

• 单位
  农业部; 上海市农业科学院食用菌研究所; 上海海洋大学