检测山羊贝氏柯克斯体抗体的间接ELISA方法的建立

作者：张小娟; 钱沁清; 张晓金; 孙爱静; 俞樟森; 叶娜; 贾广乐^*

来源：畜牧与兽医, 2018, 50(12): 47-52.

• 山羊
• 贝氏柯克斯体
• i ELISA

以贝氏柯克斯体Ⅱ相全菌病原体沉淀作为抗原包被酶标板,建立检测山羊贝氏柯克斯体的间接ELISA (i ELISA)方法,用该方法和美国爱德士贝氏柯克斯体检测试剂盒同时对445份临床山羊血清样品进行检测,评价二者的符合率。通过对i ELISA方法的关键反应条件进行优化,最终确定该方法的抗原包被浓度是0.5μg/mL,包被条件是4℃过夜;封闭液是10 g/L酪蛋白,封闭时间是45 min;血清稀释度是1∶400,反应时间是45 min;酶标二抗稀释度是1∶5 000,反应时间是30 min。经验证,建立的方法敏感性、特异性和重复性良好,与爱德士试剂盒的符合率为97.98%,证明该方法可用于山羊贝氏柯克斯体抗体的临床筛查。

• 单位
  绍兴文理学院; 化学化工学院; 中国检验检疫科学研究院