Nexilin在平滑肌特异性YAP1敲除小鼠膀胱中的表达及其调控机制研究

作者：陈樱涵; 邵琳; 周理林; 龚国毅; 曾健文; 蒋重和; 朱宝益^*

来源：国际医药卫生导报, 2023, 29(08).

• 膀胱
• 平滑肌
• Yes相关蛋白1
• Nexilin
• 平滑肌特异性基因敲除

目的探索在膀胱平滑肌细胞中Yes相关蛋白1(Yes-associated protein1, YAP1)对Nexilin表达的调控机制。方法构建平滑肌特异性YAP1敲除小鼠(SMMHC-CreERT2/YAPF/F);选取其中12只, 随机分为YAP1敲除组及野生型组, 每组6只, 分别以他莫昔芬或乙醇溶剂腹腔注射;2周后以免疫印迹试验(Western blot)检测膀胱组织总YAP(tYAP)及Nexilin的蛋白表达水平。体外培养人膀胱平滑肌细胞, 以溶解于含4% BSA无菌超纯水的鞘氨醇-1-磷酸(S1P)处理2 h及4 h;或通过重组腺病毒过表达YAP1, 或通过siRNA敲低YAP/TAZ(YAP1/WWTR1)后再以S1P处理, 同时设置相应的阴性对照(NC)及溶剂(BSA)对照, 逆转录实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测NEXN的表达水平。采用t检验、单因素方差分析。结果 YAP1敲除组小鼠膀胱平滑肌组织中tYAP和Nexilin表达水平分别为野生型组的(0.19±0.05)倍和(0.34±0.04)倍, 差异均有统计学意义(均P<0.05);在人膀胱平滑肌细胞中, S1P组NEXN的mRNA表达水平于2 h和4 h时分别为BSA组的(1.32±0.13)倍和(2.11±0.44)倍, 差异均有统计学意义(均P<0.05);YAP1过表达组的NEXN表达水平为空载体组的(1.78±0.15)倍(P<0.05);siYAP/TAZ+BSA组的NEXN表达水平为NC+BSA组的(0.75±0.05)倍(P<0.05);siYAP/TAZ+S1P组的NEXN表达水平与NC+S1P组比较显著下调(P<0.05), 且与siYAP/TAZ+BSA组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论在膀胱平滑肌细胞中, 转录共激活因子YAP1对Nexilin的表达具有调控作用;YAP1可能通过对Nexilin的表达调控影响膀胱平滑肌的收缩特性。

• 单位
  广州医科大学; 清远市人民医院