牛朊蛋白理化性质分析及其多克隆抗体的制备

作者：杜芬; 梅芳华; 肖庚富; 梁毅

来源：武汉大学学报(医学版), 2009, (05): 628-632.

DOI：10.14188/j.1671-8852.2009.05.001

• 牛正常细胞朊蛋白
• 致病朊蛋白
• 酸变性
• 多克隆抗体 Cell Bovine Prion Protein
• Pathogenic BoPrPSc
• Acid
• Polyclonal Antibody

目的:研究酸诱导牛正常细胞朊蛋白(BoPrPC)变性过程中间体的结构,同时制备其多克隆抗体。方法:表达纯化蛋白质后通过荧光光谱法和圆二色法分析酸性条件下BoPrPC二级结构变化。同时制备多克隆抗体,通过ELISA测定多克隆抗体效价,Western blot测定其特异性。结果:酸诱导BoPrPC去折叠并在pH 4.0条件下形成去折叠中间体,易于形成淀粉样纤维聚集体。制备的多克隆抗体效价可达到1∶6 400,能特异性结合朊蛋白。结论:折叠中间体二级结构类似致病BoPrPSc能形成淀粉样纤维聚集体,成功地制备了效价及特异性良好的兔抗BoPrPC多克隆抗体,为研究阻断致病朊蛋白形成淀粉纤维聚集体防治神...

• 单位
  武汉大学; 病毒学国家重点实验室; 生命科学学院