腹膜透析流出液中人腹膜间皮细胞的培养及转分化特征

作者：周循; 凌光辉; 邹莎琳; 段绍斌; 肖力; 孙林; 刘伏友

来源：中国现代医学杂志, 2010, 20(17): 2634-2638+2642.

• 腹膜透析
• 间皮细胞
• 细胞培养
• 上皮间充质转分化

目的建立从腹膜透析(PD)流出液中分离、培养人腹膜间皮细胞(HPMC)的方法,并检测上皮黏附连接蛋白E-cadherin、紧密连接蛋白claudin-1及间充质细胞标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达水平。方法从25例持续不卧床腹膜透析(CAPD)患者PD流出液中分离HPMC,并在体外进行原代培养。根据开始透析的时间分为新开管组(10例)和透析半年以上组(15例)。采用倒置相差显微镜、免疫组织化学染色和扫描电镜对培养的细胞进行鉴定;采用实时定量PCR检测细胞E-cadherin、claudin-1及α-SMAmRNA表达。结果 22例患者(新开管组10例,半年以上组12例)PD流出液分离的细胞在体外培养成活,经鉴定均具有HPMC的特征。实时定量PCR结果显示,半年以上组较新开管组分离的HPMC细胞E-cadherin、claudin-1 mRNA表达降低,α-SMA mRNA表达增高(P<0.05),提示出现了间充质细胞转分化(EMT)。结论该研究成功建立了PD流出液分离培养原代HPMC的方法,并证实长期PD患者HPMC存在EMT倾向。该研究的发现为进一步研究腹膜纤维化(PF)和超滤衰竭(UFF)提供了新的方法与实验依据。

• 单位
  中南大学湘雅二医院