强化乙酰辅酶A供给对解脂亚洛酵母产α-酮戊二酸的影响

作者：殷晓霞; 堵国成; 陈坚; 周景文

来源：工业微生物, 2013, 43(02): 45-50.

• 乙酸钠
• 解脂亚洛酵母
• α-酮戊二酸
• 乙酰辅酶A代谢

本实验室前期通过筛选得到一株高产α-酮戊二酸的菌株,命名为解脂亚洛酵母(Yarrowia lipolytica)WSH-Z06,以100 g/L甘油为唯一碳源,摇瓶发酵144 h后,α-酮戊二酸产量可达35 g/L左右,但是发酵液中会同时积累一定量的副产物—丙酮酸,增加了后提取等环节的成本,不利于工业化大规模生产。本研究通过外源添加一定量的乙酸钠来促进胞内乙酰辅酶A的合成。通过提高胞内乙酰辅酶A供给,加大碳代谢流从丙节点流向三羧酸循环,从而促进α-酮戊二酸的生成。此外,通过实时定量PCR技术研究添加乙酸钠前后,胞内与α-酮戊二酸合成相关的关键基因的转录变化,为揭示乙酸钠促进α-酮戊二酸合成的机理提供一定的理论依据。为了进一步验证乙酸钠对α-酮戊二酸合成的影响,在3一L发酵罐上添加4 g/L乙酸钠,α-酮戊二酸的最终产量可达51.6g/L,比对照(不添加乙酸钠)提高了22.6%,丙酮酸产量为26.2 g/L,比对照降低了26.0%。

• 单位
  食品科学与技术国家重点实验室; 工业生物技术教育部重点实验室; 江南大学