β-伴大豆球蛋白通过p38/JNK MAPK信号通路引起IPEC-J2细胞损伤

作者：彭成璐; 张瑜; 夏晓冬; 贺濛初; 舒迎霜; 冯士彬; 李玉; 王希春; 李锦春; 吴金节^*

来源：浙江农业学报, 2019, 31(02): 242-249.

• β-伴大豆球蛋白
• 猪小肠上皮细胞
• JNK
• P38

采用细胞体外培养技术,研究不同浓度7S(β-伴大豆球蛋白)对IPEC-J2(猪小肠上皮细胞)的影响。实验分为6组,A(对照组)、B(1 mg·m L-17S)、C(5 mg·m L-17S)、D(10 mg·m L-17S)、E(5 mg·m L-17S+1μmol·L-1SP600125)、F(5 mg·m L-17S+1μmol·L-1SB202190),24 h后,用CCK-8法检测细胞存活率,收集细胞用ELISA法检测NO、5-HT、IL-6和IL-10含量,用Western blot法检测p-JNK、p-p38、Bcl-2蛋白表达量,用PCR法检测Bad、Bax、Bcl-2、Bcl-xL和Caspase-3 m RNA相对表达量。检测结果表明:C组和D组的IPEC-J2细胞活性极显著降低(P <0. 01),E组和F组的细胞活性显著高于C组(P <0. 05),说明7S促进炎性细胞因子NO、5-HT和IL-6的分泌,降低IL-10的分泌,添加抑制剂使细胞因子NO、5-HT和IL-6分泌减少,IL-10的分泌增多;同时7S促进p-JNK、p-p38蛋白表达,降低Bcl-2蛋白表达,添加抑制剂可抑制p-JNK、p-p38蛋白表达,使Bcl-2蛋白表达增高。Bcl-2/Bax m RNA比值随7S浓度增加而降低,Bax/Bcl-xl比值随7S浓度增加而升高,Caspase-3 m RNA相对表达量随7S浓度增加而升高。添加抑制剂后Bcl-2/Bax比值增高,Bax/Bcl-xl比值降低,Caspase-3 m RNA降低。结果表明,7S通过p38/JNK MAPK信号通路引起仔猪肠上皮细胞损伤。

• 单位
  安徽农业大学; 动物科技学院