摘要
目的探讨IFN-γ对诱导结肠癌细胞系CT26中IL-33表达的影响。方法分别用IFN-γ、IFN-γ联合PKA抑制剂H89处理CT26细胞(分别设为IFN-γ组和IFN-γ+H89组),同时设置阴性对照组(NC);实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测CT26细胞中PKA、CREB和IL-33 mRNA表达;western blot检测CT26细胞中PKA、CREB、p-CREB和IL-33蛋白的表达;免疫荧光共聚焦试验检测CREB蛋白在CT26细胞中的定位。结果 IFN-γ组细胞中PKA、CREB和IL-33 mRNA相对表达量分别为2.50±0.11、3.10±0.08和2.80±0.22,均明显高于NC组(P均<0.05); IFN-γ+H89组PKA、CREB和IL-33 mRNA相对表达量分别为0.21±0.02、0.59±0.05和0.35±0.04,均明显低于NC组和IFN-γ组(P均<0.05)。western blot检测PKA、CREB、IL-33蛋白的表达水平与mRNA的表达结果均一致。免疫荧光共聚焦检测结果显示,IFN-γ组CREB的表达较NC组增加;与IFN-γ组相比,IFN-γ+H89组CREB的表达减少(P均<0.05)。结论 IFN-γ通过PKA-CREB通路诱导结肠癌CT26细胞表达IL-33。
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单位苏州大学附属第三医院; 苏州大学