SFTSV重组假病毒的构建及Gc糖基化对病毒感染力的影响

作者：崇小文; 王泽群; 陈梦婷; 杜蒙育; 徐小莹; 马有祥^*; 温红玲^*

来源：中华实验和临床病毒学杂志, 2023, 37(06).

• 发热伴血小板减少综合征病毒
• Gc
• 假病毒
• 糖基化位点

目的为探究发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)中Gc及其N-糖基化位点与病毒感染性的关系, 构建了含有SFTSV Gc糖基化位点突变体的重组假病毒。方法利用定点突变和同源重组技术构建了SFTSV Gc及3个N-糖基化位点突变的真核表达载体pcDNA3.1(+)-Gc、pcDNA3.1(+)-Gc(N291Q)、pcDNA3.1(+)-Gc(N352Q)和pcDNA3.1(+)-Gc(N374Q)。验证其在293T细胞中成功表达后, 感染VSVΔG-Fluc*G假病毒, 构建4株重组假病毒并检测其对细胞感染力的影响。结果双酶切鉴定和序列测定证实成功构建真核表达载体pcDNA3.1(+)-Gc、pcDNA3.1(+)-Gc(N291Q)、pcDNA3.1(+)-Gc(N352Q)和pcDNA3.1(+)-Gc(N374Q)。间接免疫荧光和Western blot结果表明4个重组质粒均成功表达。SFTSV Gc重组假病毒对Vero细胞有感染特异性。糖基化位点突变后假病毒感染能力明显降低, 且352位糖基化位点突变株感染水平最低(P<0.001、P=0.001)。结论 SFTSV Gc的糖基化位点可能与病毒的感染力相关, 且第352位氨基酸突变后, 对病毒感染力影响最大。

• 单位
  公共卫生学院; 山东大学