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摘要
为阐明活性氧(ROS)与蜡样芽孢杆菌菌膜形成的相关性，以市售原料奶中分离的蜡样芽孢杆菌分离株为目标菌，以细菌中NADPH氧化酶介导产生的ROS为主要靶点，用外源ROS补充剂过氧化氢(H2O2)、ROS清除试剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)、NADPH氧化酶抑制剂二苯基氯化碘盐(DPI)处理蜡样芽孢杆菌，测定分析ROS变化与菌膜形成之间的关系。结果表明，0.01μmol/L H2O2、1μmol/L H2O2、100μmol/L H2O2处理组平均菌膜形成量均显著高于对照组平均菌膜形成量(P<0.05),0.1μmol/L H2O2、10μmol/L H2O2处理组平均菌膜形成量与对照组平均菌膜形成量相比无显著性差异(P>0.05)，随着H2O2浓度的升高，ROS逐渐下降。NAC各处理组平均菌膜形成量均显著高于对照组平均菌膜形成量(P<0.05)，随着NAC浓度的升高，ROS逐渐下降。DPI浓度≤1μmol/L时，随着DPI浓度的升高，平均菌膜形成量均显著高于对照组平均菌膜形成量(P<0.05),ROS逐渐下降；DPI浓度>5μmol/L时，随着DPI浓度的升高，平均菌膜形成量显著低于对照组平均菌膜形成量(P<0.05),ROS含量升高。表明在不影响蜡样芽孢杆菌生长和细胞活性的前提下，一定浓度的H2O2、NAC和DPI处理菌株能够诱导ROS减少，增强蜡样芽孢杆菌菌膜的形成。激光共聚焦显微镜结果显示，与对照组相比处理组具有更强的染色效果，呈现红色的网络结构，而未经处理组呈现松散的结构和更少的菌膜生物量，这表明ROS对蜡样芽孢杆菌菌膜的形成存在抑制作用。
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