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摘要
目的观察氧葡萄糖剥夺-再恢复(OGDR)后小胶质细胞(BV-2细胞)Toll样受体9(TLR9)及其下游信号分子的表达变化。方法对BV-2细胞进行OGDR处理,模拟脑缺血再灌注的体内过程。以常氧培养的BV-2细胞作为对照。细胞免疫化学方法检测BV-2细胞的激活。在OGDR后0h、6h、12h、24h、48h、72h,荧光定量PCR检测细胞内TLR9mRNA表达,Western Blot检测细胞内NF-κB(P65)、磷酸化NF-κB(P-P65)、IRF7、磷酸化IRF7(P-IRF7)蛋白表达,ELISA检测细胞上清TNF-α、IL-1β和IFN-β的含量。结果 OGDR后BV-2细胞由原来静止的分枝状变成激活的阿米巴状,CD68染色阳性。除0h外,其余时间点OGDR组TLR9mRNA的相对表达量与对照组相应时间点比较均有上调,表达高峰位于24h。OGDR后各时间点P65和IRF7表达无明显变化。P-P65 0h、6h、12h明显增高,24h、48h、72h表达无明显增高。P-IRF7在0h、6h无明显增高,12h-72h明显升高。OGDR后TNF-α和IL-1β表达增多,TNF-α表达高峰于24-48h,IL-1β表达高峰位于48h。IFN-β表达无明显变化。结论 OGDR后小胶质细胞TLR9信号通路的活化以促炎途径为主。
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