5/7型猪细小病毒双重PCR检测方法的建立

作者：王茂鹏; 王伟伟; 李笨; 李乐天; 鲁会军; 金宁一; 韩硕; 米志强^*; 李昌^*

来源：中国兽医学报, 2021, 41(08): 1458-1463.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2021.08.02

• 猪细小病毒5型
• 猪细小病毒7型
• 双重PCR

猪细小病毒(porcine parvovirus, PPV)是引起猪呼吸和繁殖障碍的重要病原体,感染比例逐年上升,现有PPV5和PPV7的检测效率低,故建立针对PPV5/7的多重检测方法,可增加样品利用率,提高检测效率。本研究根据2种病原的保守序列,设计特异性引物,通过对反应条件和体系优化,建立快速检测PPV5和PPV7双重PCR方法,并对该方法的灵敏性、特异性进行验证。结果显示,建立的双重PCR方法仅对PPV5、PPV7的基因组DNA有特异性扩增,对猫细小病毒(FPV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的核酸均无特异性扩增;对病原核酸混合模板的检出下限为10拷贝/μL,与单一PCR检测结果一致。本研究建立一种特异性强、敏感性高的多型PPV双重检测方法,为调查PPV5和PPV7在猪群中的感染情况提供快速检测方法。

• 单位
  中国医学科学院; 温州大学