H3N2犬流感病毒M1蛋白的原核表达及鉴定

作者：余晓颖; 田园; 张国利; 吴广谋; 刘雨玲; 李泽鸿^*; 岳玉环^*

来源：中国兽药杂志, 2019, 53(01): 1-8.

• H3N2犬流感病毒
• M1蛋白
• 原核表达
• 蛋白纯化

为制备犬流感病毒(H3N2) M1蛋白纯品,针对M1基因序列设计引物,用聚合酶链式反应(PCR)扩增目的基因片段,扩增产物克隆至表达载体pET-SUMO中并转化至宿主菌BL21(DE3),诱导表达目的蛋白,探索纯化工艺,制备目的蛋白,并用Western blot检测纯化的M1目的蛋白。通过PCR成功扩增出大小为771 bp的M1基因,成功构建p ET-SUMO-M1表达载体,表达的融合蛋白相对分子量为41 kD,主要以可溶形式表达,纯化后获得蛋白纯品,Western blot检测显示用M1蛋白(28 k D)免疫小鼠制备的多抗能与制备的蛋白纯品发生特异性反应,从而证明蛋白纯品为M1目的蛋白。试验制备出的M1蛋白纯品可为进一步制备通用型抗犬流感病毒抗体提供纯品抗原。

• 单位
  吉林农业大学; 生命科学学院