二甲双胍对H9C2心肌细胞肥大的改善作用及其机制

作者：黄德盛; 赵亚楠; 陈云; 孙艺瑶; 覃伟林; 刘谋杰; 谢菊华^*

来源：吉林大学学报(医学版), 2023, 49(03): 675-681.

DOI：10.13481/j.1671-587X.20230316

• 心肌细胞肥大
• 二甲双胍
• 线粒体融合
• 异丙肾上腺素
• 心房钠尿肽

目的:探讨二甲双胍对异丙肾上腺素(ISO)诱导的H9C2心肌细胞肥大的作用,并阐明其可能的分子机制。方法:培养H9C2细胞,采用50μmol·L-1ISO干预H9C2细胞建立心肌细胞肥大模型作为ISO组;不予处理的细胞作为对照组。Western blotting法检测2组H9C2心肌细胞中脑钠肽(BNP)蛋白表达水平。将H9C2心肌细胞分为对照组、ISO组、ISO+二甲双胍组和二甲双胍组。采用CCK-8法检测各组H9C2细胞活力,选取二甲双胍的最佳药物干预浓度和时间,采用结晶紫染色观察各组H9C2心肌细胞形态表现和横截面积,采用实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法检测各组细胞中心房钠尿肽(ANP) mRNA表达水平,线粒体荧光探针观察各组细胞中线粒体形态表现,Western blotting法检测各组细胞中线粒体融合标志性蛋白神经萎缩蛋白1 (OPA1)和线粒体融合蛋白(MFN) 2蛋白表达水平。结果:与对照组比较,ISO组H9C2心肌细胞横截面积增加(P<0.05),细胞中BNP蛋白表达水平升高(P<0.05),提示心肌细胞肥大模型造模成功。CCK-8法检测,2 mmol·L-1二甲双胍作用8h时细胞活力恢复效果最佳。RT-qPCR法检测,与对照组比较,ISO组细胞中ANP mRNA表达水平升高(P<0.05);与ISO组比较,二甲双胍+ISO组和二甲双胍组细胞中ANP mRNA表达水平降低(P<0.05)。线粒体荧光探针观察,对照组细胞中线粒体呈绿色荧光,多为短棒状,少数线粒体丝线状相连;与对照组比较,ISO组H9C2细胞中点状线粒体明显增加,ISO+二甲双胍组和二甲双胍组细胞中点状线粒体明显减少。Western blotting法检测,与对照组比较,ISO组细胞中OPA1和MFN2蛋白表达水平降低(P<0.05);与ISO组比较,ISO+二甲双胍组和二甲双胍组细胞中OPA1和MFN2蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论:二甲双胍可改善ISO诱导的H9C2心肌细胞肥大,其机制可能与其上调OPA1和MFN2蛋白表达及促进线粒体融合有关。

• 单位
  沈阳医学院; 中国医科大学附属第一医院