生防假单胞菌FD6电击转化条件的优化

作者：王诚; 刘银银; 施伟凡; 温德宇; 张清霞^*

来源：扬州大学学报（农业与生命科学版）, 2021, 42(04): 117-122.

DOI：10.16872/j.cnki.1671-4652.2021.04.020

• 防御假单胞菌
• 生防细菌
• 电击转化
• 转化效率

不同细菌电击转化效率各异,为筛选防御假单胞菌(Pseudomonas protegens) FD6电击转化最佳条件,选取具卡那霉素抗性标记的质粒pBBR-rpoD,从电场强度、电击时间、质粒添加量、电击悬浮溶液和细菌生长阶段5个方面优化电击转化条件。结果表明:当细菌培养至D600 nm值1.4左右时,在电场强度为12 kV·cm-1、电击时间为4 ms、质粒添加量为200 ng,并以1 mmol·L-1 HEPES作为电击悬浮溶液时转化效率最高,可达1.1×105转化子·μg-1(DNA)。此外,HEPES浓度的改变并未对转化效率产生影响。这一研究建立了一套防御假单胞菌FD6的高效电击转化体系,为今后该菌株在分子水平上的遗传操作提供了重要参考。

• 单位
  园艺与植物保护学院; 扬州大学