人高致病性禽流感病毒H5N1安徽株HA、M2蛋白双顺反子表达载体的构建及表达研究

作者：刘源; 张柯; 谭文杰; 王慧娟; 舒跃龙; 胡桂学; 阮力

来源：病毒学报, 2008, (06): 415-420.

DOI：10.13242/j.cnki.bingduxuebao.001874

• H5N1
• HA
• M2
• 密码子优化
• pIRES H5N1
• codon optimization
• pIRES

将我国分离的人H5N1亚型禽流感病毒A/Anhui/1/2005作为研究对象,扩增其HA和M2基因片段并克隆至DNA疫苗表达载体pVRC中,构建成真核表达质粒。为提高HA的表达量,按照人偏爱密码子将HA基因进行优化改造,经全基因合成后插入真核表达载体pVRC,以β-actin蛋白为内参比证明了优化后的HA蛋白表达效果明显提高。将M2基因和优化后的HA基因共同克隆入双顺反子表达载体pIRES中,获得同时表达HA或M2的双顺反子真核表达质粒;通过Western blot和间接免疫荧光检测方法,确认构建的重组质粒在真核细胞中成功地表达了目的蛋白HA和M2。通过上述结果为进一步开展人高致病性禽流感病毒...

• 单位
  中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所; 传染病预防控制国家重点实验室; 吉林农业大学