突变型人TRBP基因的构建及表达

作者：李俊堂; 王立锋; 王芳; 杨韬; 许彦鸣; 杨安钢

来源：现代生物医学进展, 2012, (16): 3033-3036.

DOI：10.13241/j.cnki.pmb.2012.16.017

• TRBP基因
• 突变
• pFLAG-CMV4
• 真核表达 TRBP
• Mutation
• pFLAG-CMV4
• Eukaryotic expression

目的:探讨RNAi过程中TRBP传递双链RNA的机制,构建RNA结合结构域突变的人TRBP基因真核表达载体。方法:设计突变引物,通过拼接PCR将突变型TRBP基因克隆入pFLAG-CMV4真核表达载体,经双酶切和测序鉴定正确后,命名为pFLAG-CMV4-TRBPm。瞬时转染HEK-293细胞,western-blot检测目的蛋白表达。结果:成功扩增了突变序列,构建了突变型TRBP基因的真核表达载体,转染HEK-293细胞后检测到带标签的目的蛋白表达。结论:突变型TRBP基因真核表达载体的成功构建,为进一步研究TRBP的生物学效应奠定了基础。

• 单位
  第四军医大学