对不同月龄雄性大鼠成骨细胞内钙和钙通道电流的实验研究

作者:李磊; 田万里; 孙宏丽; 田军; 陶天遵; 陶树清; 张伟; 高峰; 单宇
来源:中国骨质疏松杂志, 2006, (03): 222-225.

摘要

目的研究不同月龄的雄性大鼠成骨细胞内钙浓度及钙通道电流是否存在差异。方法采用二次酶消化法分离不同月龄(分别为1、2、3、5、7、9、11、13、15)雄性大鼠的原代成骨细胞,通过激光扫描共聚焦技术测定细胞内游离钙浓度([Ca2+]i)(以平均荧光强度表示),同时应用全细胞膜片钳技术记录成骨细胞膜钙电流(ICa)的变化。结果共聚焦结果显示随月龄增加,成骨细胞内[Ca2+]i逐渐降低,但相邻2月龄组之间细胞内[Ca2+]i无显著性差异(P>0.05);1、2、3月龄组与11、13、15月龄组成骨细胞内[Ca2+]i有显著性差异(P<0.05),5、7、9月龄组与各组相比均无差异(P>0.05)。应用全细胞膜片钳技术发现刺激电压为+10mV时,2、7、13月龄组鼠ICa分别为(-392.77±97.07)pA、(-330.33±33.86)pA和(-287.68±71.01)pA,13月龄组鼠与2月龄组鼠相比,ICa明显降低(P<0.05),而7月龄组鼠与2月龄组鼠和13月龄组鼠相比,ICa均没有明显差异(P>0.05)。结论不同月龄大鼠成骨细胞内[Ca2+]i存在差异,其机制可能与细胞膜上钙通道活性改变相关。