微小RNA-545-3p对结直肠癌细胞进展的影响研究

作者：王政宇; 刘牧林^*; 丁德胜; 葛杰; 郭玉龙

来源：中国临床药理学杂志, 2022, 38(06): 504-507+527.

DOI：10.13699/j.cnki.1001-6821.2022.06.006

• 血管内皮生长因子A
• 结直肠癌
• 侵袭
• 凋亡

目的 研究微小RNA-545-3p在结直肠癌(CRC)进展中的作用和调控机制。方法 正常培养的人结直肠黏膜上皮细胞系NCM460以及人CRC细胞系(HCT-15、HCT-116和HCT-8)分为NCM460组、HCT-15组、HCT-116组和HCT-8组。将miR-545-3p模拟物、模拟物阴性对照、miR-545-3p抑制剂、抑制剂阴性对照和血管内皮生长因子A(VEGFA)过表达载体、miR-545-3p模拟物和VEGFA过表达载体分别转染至HCT-116细胞，分别为miR-545-3p mimic组、mimic-NC组、miR-545-3p inhibitor组、inhibitor-NC组、mimic-NC+VEGFA组、miR-545-3p mimic+VEGFA组。以实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测CRC患者癌组织和细胞系中miR-545-3p和VEGFA的表达水平。以细胞计数法-8(CCK-8)检测细胞增殖能力；以Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力；以原位末端标记(TUNEL)法检测细胞的凋亡；以蛋白质印迹(Western blot)法检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和VEGFA蛋白的表达；以双荧光素酶实验检测miR-545-3p和VEGFA之间的靶向关系。结果 mimic-NC组、miR-545-3p mimic组、mimic-NC+VEGFA组、miR-545-3p mimic+VEGFA组在48 h时的光密度值分别为1.12±0.06,0.58±0.04,1.26±0.08,0.61±0.09,细胞迁移数分别为96.24±7.20,53.32±8.60,134.24±9.97,57.34±10.62,细胞侵袭数分别为85.24±6.71,47.64±8.59,121.35±11.28,63.21±7.42。以上指标，miR-545-3p mimic组与mimic-NC组相比差异均有统计学意义(均P<0.05),miR-545-3p mimic+VEGFA组与mimic-NC+VEGFA组相比，差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 miR-545-3p可通过调控VEGFA的表达进而调控结直肠癌的进展。

• 单位
  蚌埠医学院第一附属医院; 安徽省蚌埠市第三人民医院