大蒜叶凝集素基因ASAL的克隆与表达载体的构建

作者：陈德西; 何忠全; 向运佳; 胡荣平

来源：西南农业学报, 2016, (10): 2445-2449.

DOI：10.16213/j.cnki.scjas.2016.10.036

• ASAL基因
• 刺吸式害虫
• 基因克隆
• 表达载体
• 构建 ASAL gene
• Sucking pest
• Gene cloning
• Plant expression vector
• Construction

大蒜叶凝集素基因(Allium sativum leaf agglutinin,ASAL)是一种高活性的凝集素基因,且具显著的抗虫性。克隆大蒜ASAL基因将为其在转基因作物中抗虫特性研究奠定基础。本文以GenBank公布的ASAL基因序列设计特异引物,采用RT-PCR法从当地大蒜品种二水早和新都软叶的幼苗中克隆ASAL基因。结果表明,克隆的两个ASAL基因与已知基因的碱基序列相似性分别为98.7%和98.9%,氨基酸序列相似性为98.3%。将其亚克隆至表达载体中,经菌落PCR和酶切鉴定,成功构建了重组质粒。将该载体导入农杆菌EHA5a进行保存。

• 单位
  四川省农业科学院植物保护研究所