摘要
为例验证GE296_RS01455基因编码的RaeX蛋白是否在鸭疫里默杆菌耐受重金属离子中发挥作用。以RA-LZ01作为亲本株,利用结合转移和同源重组技术构建GE296_RS01455基因缺失株Δ1455和恢复株cΔ1455;测定菌株的生长曲线,说明RaeX蛋白是否参与菌株的生长;通过点板试验检测菌株对重金属离子的耐受,利用实时定量RT-PCR检测菌株在重金属离子压力下的转录水平,验证RaeX蛋白是否与菌株对重金属离子的耐受相关。结果显示,成功构建GE296_RS01455基因缺失株Δ1455和恢复株cΔ1455;RaeX蛋白灭活不影响菌株的生长能力,但菌株对重金属离子Mn、Ni和Co的耐受性显著降低;在Ni和Co离子的压力下,亲本株RA-LZ01株GE296_RS01455基因的转录水平显著上升。GE296_RS01455基因编码的RaeX蛋白介导鸭疫里默杆菌对重金属离子Mn、Ni和Co产生耐受。
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单位西北民族大学; 家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 中国农业科学院兰州兽医研究所