微小RNA-150在膀胱尿路上皮癌细胞BC-6中的作用机制研究

作者：杨涛; 王刚; 郭留雄; 魏东; 邓新娜; 董春霞; 刘俊江^*

来源：中国临床药理学杂志, 2019, 35(17): 1893-1897.

DOI：10.13699/j.cnki.1001-6821.2019.17.017

• 膀胱尿路上皮癌
• 微小RNA-150
• 增殖
• 凋亡

目的研究微小RNA-150(miR-150)在膀胱尿路上皮癌细胞BC-6中的作用机制。方法 (1)将膀胱尿路上皮癌细胞株BC-6分为3组:空白对照组、miR-150抑制剂组和阴性对照组。miR-150抑制剂组和阴性对照组分别用Lipofectamine 2000将浓度均为100 nmol·L-1的miR-150 inhibitors和无意义序列转染至细胞,空白对照组不做处理。(2)在空白对照组中,加入磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/丝苏氨酸蛋白激酶(Akt)信号通路抑制剂——LY294002,作为LY294002组。以细胞毒性检测试剂盒检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白免疫印迹法检测Cleaved caspase-3、PI3K、Akt和磷酸化丝苏氨酸蛋白激酶(p-Akt)相对表达量。结果 (1) 48 h,miR-150抑制剂组、阴性对照和空白对照组细胞增殖率分别为(23. 97±3. 28)%,(98. 14±1. 34)%和(99. 86±1. 15)%;上述这3组的细胞凋亡率分别为(16. 32±3. 19)%,(1. 86±0. 24)%和(0. 79±0. 15)%;上述这3组的PI3K相对表达量分别为0. 21±0. 03,0. 53±0. 12和0. 56±0. 11;上述这3组的Akt相对表达量分别为0. 08±0. 01,0. 21±0. 05和0. 23±0. 04;上述这3组的p-Akt相对表达量分别为0. 70±0. 10,0. 69±0. 12和0. 72±0. 11;上述这3组的Cleaved caspase-3相对表达量分别为0. 58±0. 11,0. 23±0. 04和0. 24±0. 03。阴性对照组和miR-150抑制剂组与空白对照组比较,上述指标的差异均有统计学意义(均P <0. 01)。(2) 48 h,LY294002组和空白对照组的细胞增值率分别为(27. 02±3. 13)%,(99. 86±1. 15)%; LY294002组和空白对照组的细胞凋亡率分别为(12. 31±3. 07)%,(0. 79±0. 15)%; LY294002组与空白对照组比较,上述指标的差异均有统计学意义(均P <0. 01)。结论干扰miR-150表达能够抑制膀胱尿路上皮癌BC-6细胞株的增殖,并通过上调Cleaved caspase-3促进细胞凋亡,其调控作用可能与PI3K/Akt信号通路有关。

• 单位
  河北省人民医院