重组大肠杆菌生产硫磺矿硫化叶菌β-半乳糖苷酶发酵条件初步研究

作者：吴玉飞; 钱磊; 张帆; 陈晟; 吴敬

来源：工业微生物, 2012, 42(06): 47-52.

• β-半乳糖苷酶
• 重组大肠杆菌
• 发酵优化

为了实现来源于S.solfataricus的β-半乳糖苷酶的高效表达,对E.coli BL21(DE3)/pT7-7-lacS基因工程菌的发酵培养基进行优化,获得最优的发酵培养基为:甘油浓度为10 g/L,蛋白胨浓度为18 g/L,酵母膏浓度为18g/L,磷酸盐浓度为15 mmol/L,Mg2+离子浓度为5 mmol/L,乳糖诱导浓度为5 g/L。在优化条件下,β-半乳糖苷酶的酶活由初始的43.0 U/mL提高到83.4 U/mL。在此基础上,在3 L发酵罐上进行了初步放大,于DD600 50时开始流加乳糖诱导,最终酶活达172.4U/mL,为摇瓶水平的2倍,为β-半乳糖苷酶的工业化生产奠定基础。

• 单位
  江南大学; 工业生物技术教育部重点实验室; 食品科学与技术国家重点实验室; 生物工程学院