食源有害微生物DNA快速提取与多重PCR检测初探

作者：张静; 黄钢; 孙婧; 张英洁; 付宇浩; 李朝阳; 菅一鸣; 李振庭

来源：江汉大学学报(自然科学版), 2020, 48(04): 46-53.

DOI：10.16389/j.cnki.cn42-1737/n.2020.04.007

• 食源有害微生物
• DNA快速提取
• 多重PCR
• 检测

目的建立一种食源有害微生物快速检测体系。方法以致泻大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、志贺氏菌、沙门氏菌、单核细胞增生李斯特氏菌5种有害菌为检测对象,以30 s快速提取基因组DNA及多重PCR的试验技术进行了研究。结果筛选出特异性引物8对;发现致泻大肠埃希氏菌与单核细胞增生李斯特氏菌能够进行DNA快速提取PCR检测;构建了致泻大肠埃希氏菌与单核细胞增生李斯特氏菌DNA快速提取多重PCR检测体系,筛选出多重PCR成功的引物组合4对:rfbE/Hly、fbE/HlyA1、rfbE/HlyA2和eaeA/HlyA2,并对试验体系进行了优化。结论利用DNA快速提取多重PCR检测某些食源有害微生物是可行的。但是,针对具体情况采取措施优化反应十分必要,针对多重PCR设计相应引物,可能是优化关键。

• 单位
  生命科学学院; 江汉大学