基于TaqMan MGB探针的黑白轮枝菌检测方法

作者：郭立新; 张祥林; 陈先锋; 段维军

来源：植物检疫, 2017, 31(01): 32-36.

• 黑白轮枝菌
• 实时荧光PCR
• TaqMan-MGB探针
• 检测

根据黑白轮枝菌(Verticillium albo-atrum)及其近似种β-微管蛋白基因(β-tubulin)序列差异,设计并合成1对引物和1条Taq Man-MGB探针,建立了黑白轮枝菌的实时荧光PCR检测方法。对供试黑白轮枝菌及其近似种实验表明,该方法特异性强,只有黑白轮枝菌可被检出。通过对反应体系的优化,确定了最佳反应条件:引物终浓度为1.0μmol/L,探针终浓度为0.7μmol/L。灵敏度试验结果显示,最低检测限量为总DNA含量10 pg(20μL反应体系)。此方法快速灵敏,为快速检测黑白轮枝菌提供了重要参考。

• 单位
  宁波检验检疫科学技术研究院; 新疆出入境检验检疫局