肠道病毒71型3D蛋白关键氨基酸突变对病毒增殖的影响

作者：徐小莹; 张海陆; 张玉磊; 王耀; 韦雪敏; 袁浩闻; 梁昊; 赵丽; 王志玉; 温红玲^*

来源：中华实验和临床病毒学杂志, 2022, 36(01): 29-33.

• EV71 3D蛋白
• 突变
• 病毒复制
• 三级结构

目的研究肠道病毒71型(enterovirus 71, EV71)中3D蛋白关键氨基酸突变对病毒增殖的影响, 并根据3D三级结构模型推断突变影响病毒增殖能力的可能机制。方法以强毒株SDLY107构建的质粒pMD19T-SDLY107-EGFP为模板, 利用定点突变和反向遗传学技术构建病毒突变株, 对突变株增殖特性进行测定。同时对3D蛋白三级结构进行预测, 根据3D蛋白的结构域功能特性推测突变影响病毒增殖能力的可能机制。结果经过双酶切鉴定和病毒基因测序证实已成功构建两株突变株病毒:EGFP-EV-A71(S37N)和EGFP-EV-A71(R142K)。两株突变株在RD细胞中的增殖速率均明显弱于亲本毒株。3D蛋白三级结构预测模型显示3D蛋白由"手指(finger)"、"拇指(thumb)"和"手掌(palm)"三个结构域构成握杯状右手结构, S37N位于"拇指"结构域, R142K位于"手指"结构域, 而"拇指"和"手指"结构域对3D聚合酶的活性以及蛋白的稳定性具有重要影响。结论 S37N和R142K突变降低了EV71的复制能力, 这两个突变可能是通过改变3D蛋白聚合酶活性和结构域之间的相互作用, 进而影响EV71病毒增殖。

• 单位
  山东大学; 公共卫生学院