摘要
目的 研究远志多糖最佳除蛋白工艺以及单糖组成,对远志多糖的神经保护活性进行初步探讨。方法 采用热水浸提法提取远志总多糖,从酶法、Sevag法、酶-Sevag法以及三氯乙酸(trichloroacetic acid,TCA)-正丁醇法4种除蛋白方法中筛选出远志总多糖除蛋白的最佳方法,并用响应面法优化该方法得到远志总多糖除蛋白最佳工艺。将除蛋白后的远志总多糖超滤纯化得到远志多糖。将远志多糖完全酸水解后,经1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生后,用HPLC研究远志多糖的单糖组成及比例。用H2O2诱导损伤的PC12神经细胞研究远志多糖神经的保护作用。结果 TCA-正丁醇法是远志总多糖最佳除蛋白方法,经响应面优化,远志总多糖TCA-正丁醇法除蛋白的最佳工艺为TCA∶正丁醇=1∶7.5,远志总多糖溶液∶TCA-正丁醇溶液=1∶4.0,振摇时间为33.0 min。远志多糖由半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖4种单糖组成,其摩尔比为2.37∶4.79∶1∶2.97。远志多糖对PC12细胞增殖没有明显的毒性,且对H2O2诱导损伤的PC12细胞有保护作用。结论 TCA-正丁醇法能有效除去远志总多糖的蛋白质,远志多糖由半乳糖醛酸、半乳糖、葡萄糖和阿拉伯糖组成,且有神经保护作用。
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