摘要

目的探讨葡萄糖饥饿对胃癌AGS和MKN28细胞MMP-2、MMP-9表达的影响及意义。方法胃癌细胞AGS和MKN28在含不同葡萄糖浓度(5 mmol/L、1 mmol/L、0.5 mmol/L、0.05 mmol/L、0 mmol/L)培养液中培养24 h后,Western blotting检测细胞内MMP-2、MMP-9蛋白表达变化,荧光定量PCR检测MMP-2、MMP-9 mRNA表达变化,明胶酶谱实验检测细胞培养上清中MMP-2、MMP-9活性。CCK-8检测在葡萄糖饥饿环境下外源性脯氨酸(5 mmol/L)对胃癌细胞活力的影响。结果随着培养液中葡萄糖浓度降低,胃癌细胞内MMP-2和MMP-9在蛋白水平和转录水平呈浓度梯度依赖上调,且在葡萄糖完全缺乏条件下表达上调达到最大。对培养液上清中酶活性检测呈相同趋势。与未添加脯氨酸组相比,外源性添加脯氨酸(5 mmol/L)可改善葡萄糖饥饿环境下胃癌细胞活力,这一效应在12 h达到最大。结论葡萄糖饥饿可促使胃癌细胞内MMP-2和MMP-9表达及酶解活性增强,加剧细胞外基质中胶原分解代谢,而细胞外游离脯氨酸可支持乏营养肿瘤微环境下胃癌细胞的存活。

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