胶质瘤C6肿瘤干细胞蛋白质组学初步分析

作者：王存祖; 王宁; 欧阳琦; 黄钱焕; 赵鹏; 尤永平; 傅震; 杨伟现; 仇有成; 许慧中

来源：江苏大学学报(医学版), 2010, 20(06): 469-472+455.

DOI：10.13312/j.issn.1671-7783.2010.06.022

• C6胶质瘤细胞系
• 脑肿瘤干细胞
• 双向凝胶电泳
• 蛋白质组学

目的:运用蛋白质组学的方法,对C6脑肿瘤干细胞(BTSC)和非BTSC细胞进行配对研究,建立差异性蛋白文库,为探讨胶质瘤病因提供初步线索。方法:在C6细胞中,参照神经干细胞(NSC)培养条件进行培养。出现典型的神经球后,利用免疫荧光染色检测细胞标记,包括nestin,神经元特异性烯醇化酶(NSE),神经胶质细胞纤维酸性蛋白(GFAP)等,以及诱导分化等方法,鉴定神经球细胞是否为BTSC。收集神经球和非神经球细胞,进行配对,利用双向凝胶电泳(2D-PAGE)检测细胞总体蛋白,分析差异性蛋白点。结果:C6细胞在NSC培养条件下,出现比较典型的神经球。神经球细胞nestin阳性,NSE和GFAP阴性。经诱导发生分化,分化后细胞形态与C6相似,能够表达NSE和GFAP等多种表型细胞标记,证实这种神经球细胞为肿瘤干细胞。在2D-PAGE结果中,C6肿瘤干细胞和非干细胞配对比较,有统计学差异(P<0.05)的蛋白点共有84个,大于2倍差异蛋白点有50个,大于3倍的有17个,大于4倍的有6个,最大差异倍数为11.607 2。在BTSC中,有55个差异蛋白表达增多(上调),29个蛋白表达下降(下调)。结论:胶质瘤C6细胞系中存在肿瘤干细胞,在蛋白质组学方面与非BTSC细胞有明显差异。

• 单位
  江苏大学附属医院; 江阴市人民医院; 南京医科大学第一附属医院; 江苏大学; 基础医学院; 南京医科大学