miR-101-3p靶向E2F2调控黑色素瘤细胞增殖的分子机制探讨

作者：李吻吻; 朱智鑫; 韩利民; 焦艳林; 翁宗琴; 赵海龙^*

来源：天津医药, 2022, 50(11): 1121-1127.

• 黑色素瘤
• E2F2转录因子
• 细胞增殖
• miR-101-3p

目的 探讨miR-101-3p靶向E2F转录因子2(E2F2)调控黑色素瘤细胞增殖的作用机制。方法 使用GEPIA、OSskcm等数据库联合分析E2F2在黑色素瘤中的表达，并评估转录因子E2F2在黑色素瘤预后中的价值；利用短发夹RNA(shRNA)抑制黑色素瘤细胞MV3中E2F2表达后，分别采用PI染色和流式细胞术检测细胞周期的改变；Westernblot实验检测细胞周期蛋白E(CyclinE)和细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)的表达水平；免疫荧光实验检测细胞中自噬相关蛋白LC3B的表达水平；裸鼠荷瘤实验观察黑色素瘤在体内生长的变化。经miR-101-3pmimics处理后，采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测MV3细胞中miR-101-3p的表达水平，同时利用qPCR和Westernblot实验检测E2F2的表达水平；通过MTT、BrdU法检测MV3细胞增殖水平。结果E2F2表达升高的患者预后更差（P<0.05）；与shGFP组相比，shE2F2组中处于G0/G1期的细胞比例显著增多（P<0.05）,CyclinE和CDK2的表达水平显著降低，自噬相关蛋白LC3B荧光信号明显减少（P<0.05），体内黑色素瘤形成质量显著降低（P<0.05）；采用miR-101-3pmimics处理后，MV3细胞中miR-101-3p的表达水平明显升高（P<0.05）,E2F2的mRNA和蛋白表达均显著低于NCmimics处理组（P<0.05），同时MTT结果表明miR-101-3pmimics组MV3细胞的活力显著降低（P<0.05）,BrdU标记试验结果显示miR-101-3pmimics组细胞中BrdU阳性信号明显减少（P<0.05）。结论 miR-101-3p可靶向E2F2并抑制其表达，进而降低黑色素瘤细胞增殖水平。

• 单位
  基础医学院; 遵义医科大学