尼罗罗非鱼Galectin-related protein B基因的原核表达与条件优化

作者：黄永雄; 牛金中; 杨世平^*; 简纪常^*

来源：安徽农学通报(上半月刊), 2020, 26(18): 12-15.

DOI：10.16377/j.cnki.issn1007-7731.2020.18.004

• 尼罗罗非鱼
• 凝集素相关蛋白B
• 原核表达
• 条件优化

Galectin-related protein B是一种缺乏半乳糖苷结合活性的半乳糖凝集素相关蛋白B。基于NCBI公布的尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)Galectin-related protein B基因序列设计带酶切位点引物,构建原核表达载体pET-28a-GRPB,将重组质粒导入大肠杆菌,诱导重组质粒的蛋白表达,并对蛋白表达条件进行优化。结果表明:在28℃条件下,IPTG浓度为0.20mmol/L,诱导6h时,诱导重组蛋白的效果最佳;经Western-blot免疫印迹显示,纯化后的重组蛋白能与带HIS标签的单抗特异结合,条带单一,进一步证明该重组蛋白为Galectin-related protein B蛋白。

• 单位
  广东海洋大学; 广东省水产经济动物病害控制重点实验室; 广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室