人类CC3配体样蛋白1在果蝇Schneicier-2细胞的表达和活性分析

作者：徐斌; 石英; 李俊红; 张薇; 吴昊; 陈德喜

来源：中华传染病杂志, 2007, 25(09): 538-542.

• CCL3L1
• HIV-1
• 获得性免疫缺陷综合征
• 受体，CCR5
• 趋化因子类
• 果蝇属

目的对HIV-1辅助受体趋化因子受体5(CCR5)配体人类CC3配体样蛋白1 (CCL3L1)进行果蝇Schneider-2细胞融合蛋白表达,纯化后活性分析。方法克隆人类CCL3L1 cDNA,构建CCL3L1表达载体pMT/BiP/His,获得Schneider-2果蝇细胞表达的His-CCL3L1融合蛋白,同时克隆pCDNA3.1-flag-CCR5表达载体,培养稳定表达flag-CCR5的细胞株,检测表达人趋化因子CCL3L1活性。结果成功构建人趋化因子CCL3L1融合蛋白真核表达载体pMT/BiP/His,表达并纯化出融合蛋白His-CCL3L1。免疫沉淀法和Western印迹法分析发现,纯化的His-CCL3L1蛋白能特异性结合CCR5受体,His-CCL3L1蛋白在浓度1～50 nmol/L存在剂量依赖性,50～100 nmol/L无剂量依赖性。结论果蝇Schneider-2细胞表达的His-CCL3L1蛋白具有与天然CCL3L1相同的生物学活性,为进一步探讨CCL3L1影响HIV-1感染的机制奠定了基础。

• 单位
  首都医科大学附属北京佑安医院