鼠抗人天冬酰胺合成酶(ASNS)单克隆抗体的制备与肿瘤表达检测

作者：史薇; 张青云; 贾战生; 徐建军; 王雅明; 勇威本

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2011, (01): 74-77.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.005837

• 天冬酰胺合成酶
• 单克隆抗体
• Western blot
• IHC ASNS
• monoclonal antibody
• Western blot
• IHC

目的:通过制备抗天冬酰胺合成酶(ASNS)单克隆抗体(mAb),检测ASNS在不同肿瘤中的表达,探索其表达的意义。方法:诱导表达融合蛋白MS2-ASNS,以纯化的MS2-ASNS蛋白免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与Sp2/0融合,以融合蛋白MS2-ASNS和MS2-PAI通过间接ELISA双筛和有限稀释克隆化,获得稳定分泌抗ASNS mAb的杂交瘤细胞株。间接ELISA和Western blot方法对抗ASNS mAb效价、特异性及亲和力进行鉴定。IHC技术检测ASNS在肿瘤细胞株及肿瘤组织中的表达。结果:获得2株能高效分泌特异性抗ASNS mAb的杂交瘤细胞株F4-15、F4-16,亚类均为...

• 单位
  第四军医大学; 北京市肿瘤防治研究所