摘要
目的 研究CD4+淋巴细胞系中转录因子cAMP反应元件结合蛋白(CREB)对miR-30a的表达调节作用。方法 利用UCSC和Ensembl网站确定miR-30a基因启动子区;EMBOSS Cpgplot网站分析启动子区DNA序列的甲基化情况;ECR Browser网站分析启动子区转录因子结合区域及其保守性;JASPAR数据库筛选启动子区结合的转录因子;染色质免疫沉淀检测小鼠CD4+淋巴细胞中miR-30a基因启动子区CREB的结合量;依据培养基中是否添加CREB抑制剂KG-501将小鼠CD4+淋巴细胞分为对照组、溶剂对照组和KG-501处理组,RT-qPCR检测KG-501对细胞中miR-30a表达的影响。结果 miR-30a基因启动子区未发现可被甲基化的CpG岛;启动子区含有高保守性的转录因子结合序列,其中包含多个CREB的结合位点;转录因子CREB直接结合于miR-30a基因启动子区的上游区段;添加KG-501可明显下调细胞中miR-30a的表达(P<0.05)。结论 转录因子CREB直接结合于小鼠CD4+淋巴细胞中miR-30a基因启动子区的特定位点,调节miR-30a的表达。
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单位江苏医药职业学院