盐酸可乐定人工抗原及其鼠源多抗的制备

作者：王耀; 曹金博; 曹夕丹; 李铁梅; 邢云瑞; 孟继秋; 庞杏豪; 孙亚宁; 陈秀金; 李兆周; 胡骁飞^*

来源：西北农业学报, 2021, 30(11): 1595-1602.

• 盐酸可乐定
• 人工抗原
• 多抗
• ELISA

以盐酸可乐定(Clonidine hydrochloride,CLO)的衍生物盐酸阿可乐定(Apraclonidine hydrochloride,ACLO)为半抗原,采用重氮化法合成人工抗原,免疫小鼠制备高敏感性、特异性的CLO鼠源多抗并进行鉴定,为CLO单克隆抗体的制备奠定基础。将ACLO分别与牛血清白蛋白(Bovine serum albumin,BSA)和鸡卵清蛋白(Ovalbumin,OVA)偶联,合成免疫原CLO-BSA和包被原CLO-OVA,经紫外扫描和SDS-PAGE凝胶电泳鉴定偶联效果后,免疫BALB/c小鼠,并对获得的鼠源多抗采用间接ELISA和间接竞争ELISA鉴定其特性。结果显示,免疫的4只小鼠血清抗体效价均达到1∶25 600以上,其中2号小鼠的抗体敏感性最高,半数抑制质量浓度(IC50)为7.026ng/mL,与其他几种常见瘦肉精类药物的交叉反应率均小于0.1%,特异性良好。表明成功合成免疫原性良好的CLO人工抗原,并获得敏感性高、特异性强的CLO鼠源多抗,为其单克隆抗体的制备及免疫学快速检测方法的建立奠定良好基础。

• 单位
  食品与生物工程学院; 西北农林科技大学; 中国检验检疫科学研究院; 河南科技大学; 河南省农业科学院