农杆菌介导甘蔗愈伤组织遗传转化体系的优化

作者：秦翠鲜; **良; 桂意云; 汪淼; 周建辉; 廖青; 李杨瑞; 黄东亮

来源：中国生物工程杂志, 2013, 33(09): 66-72.

DOI：10.13523/j.cb.20130910

• 甘蔗
• 农杆菌
• 遗传转化

以甘蔗胚性愈伤组织为材料,对愈伤组织增殖、分化、幼苗生根的最适抗生素(Km)浓度进行筛选,并对影响农杆菌介导的甘蔗遗传转化因素:预培养时间、侵染时间和共培养时间等进行了研究。最后确立了甘蔗愈伤组织增殖、分化及幼苗生根三个阶段的最适抗生素(Km)浓度分别为300 mg/L,40 mg/L,20 mg/L。确定了农杆菌浸染的预培养时间、侵染时间和共培养时间分别为4d,30min,4d。PCR检测表明,61.6%的抗性植株可扩增出预期的片段,表明外源基因已经整合到甘蔗基因组中。为进一步的甘蔗基因功能验证及转基因研究提供良好的技术支撑。

• 单位
  广西农业科学院; 广西壮族自治区农业科学院甘蔗研究所; 农业部; 中国农业科学院