PLEKHQ1基因敲除小鼠胚胎成纤维细胞永生化细胞系的建立

作者：张鹏飞; 张硌; 陆琤; 周晨辰

来源：中国医学装备, 2017, 14(08): 158-160.

• 基因PLEKHQ1
• SV40大T抗原基因
• 慢病毒感染
• 胚胎成纤维细胞
• 永生化

目的:建立PLEKHQ1基因敲除小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)永生化细胞系,为全面研究PLEKHQ1基因功能提供细胞实验材料。方法:采用慢病毒感染的方法将猿猴病毒40(SV40)大T抗原基因导入已鉴定出基因型的MEF中,建立永生化细胞系;利用聚合酶链反应(PCR)检测SV40大T抗原基因在MEF中的整合情况,利用反转录PCR及凝胶成像的方法观察SV40大T抗原基因在MEF中的表达。结果:SV40大T抗原基因已整合至MEF中,且此类MEF已扩大培养及稳定传代半年之久。结论:成功建立的PLEKHQ1基因敲除MEF永生化细胞系,可为进一步研究PLEKHQ1基因功能提供细胞实验材料。