整合高分辨熔解曲线和Sanger测序的MTHFR基因C677T多态性检测新方法及其应用

作者：王榕; 白慧丽; 程伟; 张玉洪^*

来源：重庆医学, 2019, 48(01): 161-163.

• 高分辨熔解曲线
• 亚甲基四氢叶酸还原酶(NADPH)
• 多态性,单核苷酸
• Sanger测序

目的建立一种基于整合优化的高分辨熔解曲线(HRM)和Sanger测序的分子诊断新方法,并探索其亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T多态性(rs1801133)检测应用。方法针对MTHFR基因C677T设计一对带有M13接头的通用引物,通过优化HRM反应体系,提高HRM的分析性能;并利用M13接头作为测序引物直接对HRM产物进行Sanger测序验证。收集该院体检中心的外周血标本1 030份,应用所建立的新方法检测标本MTHFR基因C677T多态性。结果成功建立了基于整合优化的HRM和Sanger测序的新方法,并成功应用于临床标本MTHFR基因C677T多态性检测。1 030份标本中,CC基因型占39.13%,CT基因型占48.16%,TT基因型占12.71%。结论本研究成功建立了一种检测MTHFR基因C677T的新方法,该方法具有简便经济、快速准确和高通量的特点,适用于临床大规模检测。

• 单位
  重庆医科大学附属第一医院