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摘要
目的研究周围神经体外预变性的新方法,以便在短期内获得大量高效许旺细胞,观察其组建的组织工程化神经对坐骨神经缺损再生效果。方法创建小鼠坐骨神经缺损模型,坐骨神经保持5mm缺损。C57BL/6小鼠骨髓源细胞(BMDCs)与其坐骨神经体外共培养为实验A组,无BMDCs介入的坐骨神经体外培养为对照B组。培养7 d后行大体观察,复合酶消化预变后的神经片段,行许旺细胞培养。将两组许旺细胞配成浓度为1×108/ml,分别组建许旺细胞-细胞外基质-许旺细胞聚乳酸管(PLA)的组织工程化神经,修复坐骨神经缺损模型,建立小鼠A、B组模型。同时建立对照C组(不含许旺细胞的PLA管修复坐骨神经缺损)和自体神经移植D组。建模后12周行神经传导速度、小腿三头肌湿质量检测和组织切片检查。结果神经片段培养7 d后A组较B组增粗明显,经酶消化细胞培养48 h在倒置相差显微镜和荧光显微镜下观察A组数量和纯度均高于B组。建模后12周A组小鼠神经传导速度、小腿三头肌湿质量恢复率均高于B、C组(P<0.01),与D组接近。光镜和电镜观察导管内再生神经远1/3段,A、D组比B、C组神经纤维多,髓鞘厚。结论坐骨神经与骨髓源细胞体外共预变,大量高效许旺细胞在短时间内可以取得。该方法获取的许旺细胞组建的组织工程化神经对坐骨神经缺损再生的效果较好。
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