实时荧光定量PCR检测普氏立克次体

作者：杨晓; 陈梅玲; 温博海; 牛东升; 朱丽娜; 李青凤; 孙长俭

来源：中华流行病学杂志, 2006, (11): 963-967.

DOI：10.3760/j.issn:0254-6450.2006.11.012

• 流行性斑疹伤寒
• 普氏立克次体
• 实时定量PCR
• 外膜蛋白B基因 Epidemic typhus
• Rickettsia prowazekii
• Quantitative real-time PCR
• ompB

目的采用新型TaqMan-MGB探针建立检测普氏立克次体的实时荧光定量PCR方法。方法根据普氏立克次体外膜蛋白B的基因(ompB)序列设计引物和探针,以克隆的OmpB基因片段作DNA模板,在荧光定量PCR检测仪(ABI 7900型)上建立实时荧光定量检测方法。结果建立的定量标准曲线的循环阈值(Ct)与模板拷贝数呈良好的线性关系(r=0．999)；与巢式PCR相比较,荧光定量PCR检测敏感性是其100倍。用荧光定量PCR检测莫氏立克次体及其他相关立克次体和细菌DNA,检出结果均为阴性。用荧光定量PCR检测普氏立克次体感染的豚鼠血标本,某些样本检测为阳性,而用巢式PCR检测的结果均为阴性。结论研究...

• 单位
  军事医学科学院; 病原微生物生物安全国家重点实验室