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摘要
为探究青鳉胶质细胞源神经营养因子（glial cell line-derived neurotrophic factor，GDNF）在精巢中的细胞表达模式，及视黄酸（retinoic acid，RA）和11-酮基睾酮（11-ketotestosterone，11-KT）对其表达调控作用，本研究通过荧光原位杂交（fluorescent in situ hybridization，FISH）检测了青鳉Gdnf的两个复制基因（即gdnfa与gdnfb）在精巢中的细胞表达模式，并通过实时定量聚合酶链式反应（real-time quantitative-polymerase chain reaction，qRT-PCR）、5’端上游序列转录活性分析等从组织、细胞及分子水平探究了精巢分化发育重要调控因子RA和11-KT对两者的表达调控作用。结果显示，在精巢中，gdnfa主要表达于体细胞，而gdnfb除表达于体细胞外，在生殖细胞中也有明显表达。不同浓度RA和11-KT处理体外培养的青鳉精巢组织及其传代培养体细胞MTS1，结果表明，两者均可显著下调gdnfa的表达，而上调gdnfb的表达。分别用gdnfa与gdnfb不同截短5’端上游序列的荧光素酶报告载体转染MTS1，结果显示，RA处理可降低gdnfa的多个截短5’端上游序列荧光素酶活性，而增强gdnfb的多个截短5’端上游序列荧光素酶活性，11-KT处理的结果与此基本相似。综上，青鳉gdnfa与gdnfb在精巢中具有差异的细胞表达模式，同时两者在组织、细胞及分子水平均受到了RA和11-KT的差异化调控。本研究深化了我们对于鱼类Gdnf两个复制基因的细胞表达模式及其调控的深入认识，为其进一步生物学功能研究奠定了重要基础。
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单位西南大学; 生命科学学院
